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科研新手必读:10大信号通路全解析 信号通路,也就是我们常说的Signaling pathway或Signal transduction,简直是科研中的万能钥匙。它能够通过一组已知的、具有特定上下游关系的分子来解释整个分子机制的奥秘。每个通路都有其标志性分子(Biomarkers),只要掌握了这些关键分子,就能窥见整个通路的运作原理。 目前,科研中最热门的9种信号通路分别是:NF-、PI3K/AKT、MAPK、JAK-STAT、TGF-Wnt、Notch、Hedgehog和Hippo通路。在学习这些通路时,不必深究每一个细节,只需抓住每个通路中最关键的几个分子即可。 跨通路学习的小贴士: 初级阶段:无需深挖细节,把握关键分子即可。 关键分子:每个通路都有代表性的标志性分子,弄清楚它们就能见微知著。 继续往下拉,查看更多详细内容!
YAP和TEAD1直接被AARS1乳酸化,被SIRT1去乙酰化 第一步,AARS1分别乳酸化YAP和TEADK90和K108位点 乳酸化蛋白质组学KEGG分析富集多种通路,重点集中在Hippo信号通路上,YAP和TEAD1分别在K90和K108位点发生了乳酸化(图1a-b)。IP-WB检测也显示YAP-TEAD发生乳酸化(图1c)。此外,构建YAP K90R和TEAD1 K108R突变体进行IP-WB检测显示没有发生乳酸化(图1d)。另外,葡萄糖剥夺降低YAP-TEAD1的乳酸化水平,而乳酸处理明显恢复其的乳酸化水平(图1e-f)。 第二步,AARS1与YAP-TEAD1相互作用 Co-IP实验发现AARS1与YAP-TEAD1互作(图1g),细胞分离实验表明主要发生在细胞核内(图1h)。GST pulldown实验也显示AARS1和YAP-TEAD1直接互作(图1i-j)。体外乳酸化实验表明,AARS1能够直接使WT TEAD1乳酸化(图1k),但不能使其K108R突变体乳酸化(图1l)。 在HEK293FT细胞中,过表达WT AARS1而非其5M突变体促进了YAP-TEAD1的乳酸化(图1m),而敲低AARS1则显著降低了YAP-TEAD1的乳酸化水平(图1n)。表明AARS1与YAP-TEAD1相互作用,并使其乳酸化修饰。 第三步,YAP和TEAD直接被SIRT1去乙酰化 探索可能导致YAP去乙酰化的酶。Sirtuin(去乙酰化酶)抑制剂烟酰胺(NAM)处理细胞,显著增加了YAP的乳酸化(图2a)。对sirtuin去乙酰化酶家族成员(SIRT1-SIRT7)进行筛选,发现SIRT1的过表达显著降低了YAP的乳酸化水平(图2b)。同时,Co-IP实验显示SIRT1与YAP相互作用(图2c)。构建SIRT1的催化缺陷突变体(H363Y),Co-IP实验发现SIRT1的催化缺陷突变体(H363Y)未能降低细胞中YAP的乳酸化水平(图2d)。表明SIRT1使YAP和TEAD去乙酰化,导致YAP和TEAD乳酸化水平增加。 全文分享可查阅:【《JCI》解读:肿瘤乳酸化修饰与泛素化修饰对抗!丙烯酰tRNA合成酶AARS1乳酸化修饰YAP复合体促进信号传导】。 #科研#⠂ #coip实验#⠂ #wb实验#⠂ #GST pulldown
YAP-TEAD的乳酸化促进Hippo通路靶基因表达 第一步,YAP-TEAD的乳酸化促进Hippo通路靶基因的表达 质核分离分析显示,乳酸强烈促进WT YAP的核定位,但不促进其K90R突变体的核定位,表明乳酸诱导的YAP激活需要K90乳酸化(图1e)。Co-IP实验发现乳酸增强TEAD1与WT YAP的相互作用,而不是其K90R突变体(图1f)。此外,乳酸增加了过表达WT YAP的细胞中CTGF和CYR61的mRNA水平,但过表达YAP K90R突变体的影响较小(图1g)。ChIP实验显示,乳酸处理增强了WT TEAD1在CTGF和CYR61启动子上的占据,而不是其K108R突变体(图1h)。表明细胞内乳酸促进了YAP-TEAD1的乳酸化水平和转录活性。 第二步,YAP-TEAD1的乳酸化和泛素化之间的相互作用 核质分离实验显示,大部分乳酸化的YAP和TEAD1定位在细胞核内,而s127磷酸化的YAP或泛素化的YAP和TEAD1主要分布在细胞质内(图1i-j)。乳酸处理降低了YAP-TEAD1的泛素化水平(图1k),促进了AARS1的核定位及其与YAP-TEAD的相互作用。此外,WT AARS1促进了YAP-TEAD1的乳酸化,但LS突变体没有(图1l)。表明YAP的乳酸化破坏了其易位进入细胞质后进行的泛素化。 全文:【《JCI》解读:肿瘤乳酸化修饰与泛素化修饰对抗!丙烯酰tRNA合成酶AARS1乳酸化修饰YAP复合体促进信号传导】。 如有相关科研问题,欢迎留言探讨。 #科研#⠂ #coip实验#⠂ #chip实验#⠂ #乳酸化#
英语论文写作必备5大润色工具 写英文论文是不是让你头疼?是不是经常收到期刊的修改意见,说你的语法不行、表达不清楚?别担心,以下这些英文表达润色工具可以帮你解决这些问题: . Thesaurus Thesaurus是英语专业的朋友推荐的,它能帮你找到你需要的词汇的近义词。系统用颜色深浅表示近义词与你搜索词汇的意义相近程度,方便你进行选择换用。 . Dictionary Dictionary能帮助你查找词汇的英文释义。有时候光看词汇的中文释义不能完全了解其意义,导致错误使用。Dictionary可以让你更准确地理解词汇。 . Word Hippo Word Hippo也是针对英文词汇使用的工具,可以在Word Hippo中查找近义词和反义词,同时Word Hippo还兼具英文释义、造句、翻译等多项功能。特别值得一提的是Word Hippo的查找特定单词功能,只要记得单词的开头或结尾,就能找到它。 . Grammarly Grammarly主要帮助你进行文章语法错误审查,指出语法错误并提出修改建议。系统还会从文章的使用正确性、表意清晰性、词汇丰富性和传达效果4个方面进行文章评价。你还可以自主设置文章的写作目标,如读者信息、文章领域、用途等,帮助系统更好地进行评价。 . AI写作助手 AI写作助手特别推荐给那些目标是SCI论文的作者们。它能帮助你寻找期刊中别人的相关表达方式,输入关键词就能收获学术级别的表达方式。你还能选择标题、引言等多种文章结构进行了解,原句信息展示得清清楚楚。 这些工具可以帮助你提升英文论文的表达能力,让你的论文更加专业和清晰。赶快试试吧!
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