孵育最新娱乐体验_孵育的拼音(2024年12月深度解析)
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离心管破裂,样品全洒! 过漫长孵育的样品,加入600ul的离心管,使用贝克曼14000rpm离心。奼盖的瞬间,惊喜变惊吓,离心管竟然裂开了!样品全部泄漏,估计是离心管尺寸与离心机不匹配。看来需要套一个1.5ml的管子进行离心。今晚的实验又是泡汤了,师兄说得对,晚上做实验真的不适合,容易让人情绪低落。
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免疫荧光染色全攻略,轻松上手! 젦术简介 免疫荧光技术(Immunofluorescence technique)是一种结合了免疫学、生物化学和显微镜技术的强大工具。通过将抗体与特定的示踪物质结合,利用抗原抗体反应,可以在组织或细胞内定位特定的抗原。这项技术的特点是特异性强、敏感性高、速度快。 ⚠️ 注意事项 免疫染色固定液含有对人体有害的多聚甲醛,操作时要特别小心,并做好防护措施,避免直接接触或吸入。此技术仅供专业人员用于科学研究,不得用于临床诊断或治疗,也不能用于食品或药品。为了您的安全和健康,请务必穿实验服并戴一次性手套操作。 3D细胞培养免疫染色操作流程 1️⃣ 细胞样本准备 a. 细胞培养:在IBAC⮠S1微孔中使用基质胶进行3D培养,直到细胞生长到合适的状态(建议细胞球直径>50 )。 b. 细胞固定:弃除培养基,用PBS清洗3次,然后加入100 的细胞固定液,室温固定20分钟。 2️⃣ 细胞通透和封闭 c. 清洗:用100 移液枪缓慢吸除废液,加入100 的PBS,浸泡10分钟,然后吸除。重复清洗3次。 d. 穿膜(可选,胞内染色需要):加入100 的穿膜液,室温孵育30分钟。 e. 清洗:重复c步骤,共清洗3次。 f. 封闭:加入100 封闭液,室温孵育1小时。 3️⃣ 抗体孵育 g. 一抗孵育:用一抗稀释液按照抗体说明书的要求稀释抗体至工作液,每孔加入50 ,4℃冰箱孵育过夜或室温孵育1-2小时。 h. 清洗:回收一抗工作液并冻存(-20℃),重复c步骤,共清洗3次。 i. 二抗孵育:用二抗稀释液按照抗体说明书的要求稀释抗体至工作液,每孔加入50 ,室温孵育1-2小时。此后全程避光。 j. 清洗:回收二抗工作液并冻存(-20℃),重复c步骤,共清洗3次。 总结 通过以上步骤,您可以轻松完成免疫荧光染色,为科研工作提供有力的支持。记得在操作过程中注意安全和防护,确保实验的顺利进行。
经典童话:夏洛的网 适合年龄:小学中年级及以上 故事梗概: 约翰ⷩ🥰伯家的母猪生了一窝小猪,但因为母猪只有十个乳头,最小的小猪可能无法存活。阿尔伯原本打算将这只小猪杀掉,但他的女儿芬儿求他留下这只小猪作为宠物。芬儿给小猪取名为韦宝。 𗠩楮是一只积极乐观的小猪,总能感染周围的人和动物。几周后,韦宝被卖给了芬儿的叔叔霍莫ⷦ奅曼。尽管芬儿经常去查克曼农场看望韦宝,但小猪还是感到越来越寂寞。 𘯸 一天,一只温柔的灰蜘蛛莎乐主动与韦宝交朋友。起初,农场里的动物对莎乐感到反感,认为她恶心。但韦宝却觉得她很漂亮,并与她成为了好朋友。 有一天,农场里的老绵羊告诉韦宝,圣诞节时他会被杀掉吃掉。韦宝非常害怕,向莎乐求助。莎乐承诺会让他活下来,方法是在她网上写字来赞扬韦宝的出色,比如“SOME PIG”。这样,韦宝就有可能出名,从而免于被杀。 多亏了莎乐的帮助,韦宝在乡村大会上获得了奖项,最终没有被人杀掉。然而,莎乐在大会上死了,临死前她用尽最后的力量产卵并包裹起来。为了报答她的恩情,韦宝将莎乐的卵带回了家,并在查克曼农场中孵育。虽然多数孵出的蜘蛛都离开去开创自己的新生,但Joy、Aranea和Nellie这三只蜘蛛依旧留在农场里,并与韦宝成为了好朋友。
免疫荧光与免疫细胞化学实验全流程详解 免疫荧光(IF)和免疫细胞化学(ICC)是免疫学研究中常用的技术,通过抗原-抗体反应,结合荧光或酶标记,来检测细胞或组织中特定蛋白质的定位和表达。以下是这两种实验的详细流程: 一、玻片制备 细胞培养:将细胞培养在盖玻片或孔板中,直到达到实验所需的状态。 组织切片:将组织固定后,切成薄片,并固定在载玻片上。 二、固定 方法一:在100%冰甲醇中孵育细胞5分钟。固定完成后,用PBS洗涤细胞3次,每次5分钟。 方法二:在4%多聚甲醛中孵育细胞10分钟。固定完成后,用冰PBS洗涤细胞3次,每次5分钟。 三、抗原修复(可选) 对于某些抗体,抗原修复后可以获得更好的效果。具体修复方式请参考抗体使用说明书。 四、通透 用含0.3%Triton X-100的PBS孵育样品10分钟。注意,Triton X-100会破坏细胞膜,因此不适用细胞膜抗原。通透完后,用PBS洗涤细胞3次,每次5分钟。 五、染色(以双重染色为例) 封闭:用封闭液(1%BSA、22.52mg/ml甘氨酸、0.1%Tween-20的PBS)孵育细胞30分钟。 一抗孵育/洗涤:用两种一抗(溶于1%BSA的PBST中)在湿盒中孵育1小时,或4℃过夜孵育。然后倒出溶液,用PBS洗涤3次,每次5分钟。 二抗孵育/洗涤:室温下,用两种二抗(溶于1%BSA的BSA中)避光孵育细胞1小时。 六、复染 孵育:用0.1-1/ml Hoechst或DAPI孵育细胞1分钟。 洗涤:用PBS洗涤细胞。 七、封片 用一滴封片介质封闭盖玻片,并用指甲油密封盖玻片,避免样品变干和在显微镜下移动。样品可以保存在-20℃或4℃避光条件下。 八、数据收集与成像 使用显微镜收集数据,并进行适当的成像处理。 通过以上步骤,你可以轻松完成IF/ICC实验,并获得准确的实验结果。
太阳 文/竹林居士(河南) 高空悬挂, 满面光华。 孵育苍生, 宇宙神话。
浙大读博日常:细胞骨架免疫荧光初体验 最近在浙大读博,终于鼓起勇气尝试了一下细胞骨架染色,用的是鬼笔环肽来标记微丝。虽然第一次做,但效果还不错,至少能清楚看到微丝的存在,真是让人开心得不得了。为了拍这些照片,我可是花了四个小时在共聚焦显微镜下,真是要看吐了。不过,老板花了五百大洋,值了! 实验步骤如下: 固定细胞:用4%多聚甲醛室温下固定20分钟。 破膜处理:加入0.1%的Triton X-100,室温下处理5分钟。 封闭:用BSA封闭液室温下封闭0.5到1小时。 一抗孵育:用OPN抗体,4℃过夜孵育。 二抗染色:用AF488标记的二抗,室温下处理1小时。 Actin染色:用Tracker Red 555微丝荧光探针染色。 DAPI染色:用DAPI染料室温下处理10分钟。 封片:用抗荧光淬灭封片剂(5ul)和指甲油封片。 保存:用锡箔纸包好,4℃保存。 有个小疑问,为什么细胞核有的大有的小?那些小小的细胞核是不是也是BMSC?还是说原代培养中混入了其他细胞?或者是还没长开的年幼BMSC?又或者是已经成骨分化的成骨细胞? 顺便问一下,有没有好用的DAPI推荐?我这次用的DAPI染了十分钟,拍的时候电压调到180还要降背景才能拍出这种效果,真是累得不行。
打工人的午睡神器:帝企鹅孵化毯 对于每天忙碌的打工人来说,午睡是续命的法宝。而拥有一条既舒适又能当枕头的小毯子,简直是提升午睡幸福感的终极秘诀。 比如,这款以“帝企鹅爸爸孵育宝宝”为灵感的多用毛巾靠毯,不仅能让你彻底放松,还能带来无尽的乐趣。毯子中间有一个初来乍到的企鹅宝宝,使用时,它乖乖地坐在你身边,平时可以折叠起来塞进口袋,无论是用作靠垫还是抱枕,都能带给你极好的身心抚慰。 设计师还把可爱的海洋生物“请”到了使用频率更高的毛巾上:在平滑的海滩上,你可以和探出头的小鳗鱼打招呼;将手指伸入海豚的咯吱窝下,逗它傻乐;和睡眼惺忪的小海狮玩捉迷藏。这个可以捧在手心里的水族箱,完全可以治愈现代人的精神内耗!
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