不同周龄SHR动态血压变化及组织的形态学研究.pdf

・ｌＯ・北方实验动物科技年会・实验动物科学国际论坛２００９年ｌＯ月不同周龄ＳＨＲ动态血压变化及组织的形态学研究田永路李军刘敬浩白慧称朱德生’（北京大学实验动物中心，北京１００８７１）摘要：目的测量不同周龄ＳＨＲ的收缩压、舒张压、均值、心率、血流量及血流速度，为ＳＨＲ及有关高血压方面的实验研究提供基础数据。方法采用ＣＯＤＡ。”无刨血压仪，测量３４只８一１５周龄ＳＨＲ的收缩压、舒张压、均值、心率、血流量及血流速度。在最后一周测量完血压值后，采用４５ｍｇ／ｋｇ的戊巴比妥钠，腹腔注射麻醉处死。取胸主动脉、肺、肾、心脏和大脑，经１０％的福尔马林溶液固定，随机抽取１５只动物的标本，做常规脱水，包埋，进行ＨＥ染色。结果８～１５周龄ＳＨＲ的收缩压和心率值在各周之间均无统计学差异（Ｐ＞０．０５）。舒张压的比较中，第８周与第１５周之间存在显著差异（Ｐ＜０．０５）。血压均值的比较中，第８周与第１５周之间存在显著差异（Ｐ＜０．０５）。在组织学观察中，存在４０％的心肌细胞变性。结论ＳＨＲ的舒张压、收缩压及血压均值随周龄的增加均有上升的趋势。而心率、血流速度及血流量均有下降的趋势，但是在各周存在一定的波动。关键词：自发性高血压大鼠；高血压；血压参数；体积压力传感器技术高血压是一种常见、多发的心血管疾病，且随着年龄的增加血压有逐渐增高的趋势，但其具体机制尚不明确¨－ｚ，。有关自发性高血压大鼠作为高血压病动物模型的研究越来越广泛，但不同周龄且连续在无药物作用下血压动态变化的研究报道很少。本研究主要针对８—１５周龄ＳＨＲ的收缩压、舒张压、均值、心率、血流量及血流速度进行测量，在１５周龄后处死，对心脏进行组织学检查并观察其组织变化，为ＳＨＲ大鼠及有关高血压方面的实验研究提供基础参考数据。１材料和方法１．１材料１．１．１动物：８周龄ＳＰＦ级ＳＨＲ大鼠３４只，雄性，体重１７０—１９０９，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供，许可证号：ＳＣＸＫ一（京）２００７—０００１。１．１．２仪器：ＣＯＤＡ侧无创血压仪（ＫｅｎｔＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）；普通光学显微镜；水浴锅；电子天平ＥＳ一１０００等。１．１．３实验环境与时间：动物实验在北京大学实验动物中心屏障环境动物设施进行，实验期间动物自由采食和饮水。饲料来源：军事医学科学院实验动物中心，许可证号：ＳＣＸＫ一（军）２００７—００５。实验时间２００９年３月至５月。１．２方法１．２．１实验方法：动物先在北京大学实验动物中心进行为期３ｄ的适应，在此期间对动物进行称重，使用ＣＯＤＡ’Ｍ无创血压仪，采用体积压力传感器技术（ＶＰＲ），测量ＳＨＲ大鼠的尾动脉收缩压（Ｓｙｓｔｏｌｉｃ）、舒张压（Ｄｉａｓｔｏｌｉｃ）、平均压（Ｍｅａｎ）以及大鼠的心率（Ｒａｔｅ）、血流量（Ｖｏｌｕｍｅ）和血流速（Ｆｌｏｗ），并做好记录。将适应期的血压值作为第８周的测量值。以后每周测量一次ＳＨＲ大鼠的鼠尾动脉的收缩压、舒张压、平均压以及大鼠的心率、血流量和血流速。并且每周记录一次ＳＨＲ大鼠的精神状态、体重以及死亡情况。在最后一周测量完血压值后，采用４５ｍｇ／ｋｇ的戊巴比妥钠，腹腔注射处死。１．２．２标本采集及形态学观察：在最后一周测量完血压值后处死动物，取胸主动脉、肺、肾、心脏和大脑，经１０％的福尔马林溶液固定，随机抽取１５只动物的标本，做常规脱水，包埋，进行ＨＥ染色。使用普通光学显微镜进行观察，作出病变分析。１．２．３统计学方法：采用ＳＰＳＳｌ５．０统计软件进行作者简介：田永路（１９８３－），男，主要从事生物统计及动物实验技术。Ｅｍａｉｌ：ｄｗｘ８３０４１８＠１６３．咖。・通讯作者：**生（１９６０－），男，副教授，主要从事实验动物管理。Ｅｍａｉｌ：ｌａｅ＠ｐｋｕ．ｅｄｕ．ｃｎ。２００９年ｌＯ月北方实验动物科技年会・实验动物科学国际论坛・ｌｌ・统计学处理。先进行数据的方差齐性检验，采用Ｄｕｎｎｅｔｔ方法进行方差分析。Ｐ＜０．０５为统计学有显著差异，Ｐ＜０．０１为统计学有极显著差异。计量数据用均数±标准差表示。２结果２．１不同周龄ＳＨＲ大鼠的六种血压参数的比较见表１和表２。表１８—１１周龄ＳＨＲ的六种血压参数比较同一行数据中，上标相同者差异不显著（Ｐ＞０．０５），上标小写字母不同者表示差异显著（Ｐ（０．０５），上标大写字母不同者表示差异极显著（Ｐ＜０．０１）。Ｉｎｔｈｅｍｅｌｉｎｅ，ｔｈｅ自ＬｉＩｎｅｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔｉｎｄｉｃａｔｅｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５），ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｏｗｅｒｃａｓｅｉｎｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔｓｈｏｗｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０５）ａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｕｐｐｅｒｃａｓｅｓｈｏｗｓｅｘｔｒｅｍｅｌｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜Ｏ．０１）ｏ表２１２一１５周龄ＳＨＲ的六种血压参数比较同一行数据中。上标相同者差异不显著（Ｐ＞０．０５）．上标小写字母不同者表示差异显著（Ｐ＜０．０５），上标大写字母不同者表示差异极显著（Ｐ＜０．０１）。Ｉｎｔｈｅｓａｍｅｌｉｎｅ，ｔｈｅ矗ａｌｎｅｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔｉｎｄｉｃａｔｅｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５），ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｏｗｅｒｃａｓｅｉｎｓｕｐｅｒｓｃｒｉｐｔｓｈｏｗｓｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜０．０５）ａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｕｐｐｅｒｃａｓｅｓｈｏｗｓｅｘｔｒｅｍｅｌｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜Ｏ．０１）．由表１和表２可以看出，８—１５周龄ＳＨＲ大鼠的收缩压和心率值在各周之间均无统计学差异（Ｐ。＝０．０８９＞０．０５，ＰＲ＝０．０７３＞０．０５）。舒张压的比较中，第８周与第１５周之间存在显著差异（Ｐ。＝０．０１９＜０．０５），其它周之间均无统计学差异。血压均值的比较中，第８周与第１５周之间存在显著差异（Ｐ。＝０．０２７＜０．０５），其它周之间均无统计学差异。血流速度的比较中，第８周与第９、１１、１２、１３、１４周之间存在极显著差异（尸，＝０．０００＜０．０１）；第８周与第ｌＯ、１５周之间存在显著差异；其它周之间均无统计学差异。血流量的比较中，第８周与第９、１１、１４周之间存在极显著差异（Ｐ。＝０．０００＜０．０１），其它周之间均无统计学差异。２．２不同周龄ＳＨＲ大鼠的六种血压参数的动态变化结果见图２—３—１一图２—３—３。由图１、图２和图３可以看到从第８周到第１５周的血压情况，ＳＨＲ大鼠的舒张压、收缩压及血压均值均有上升的趋势。舒张压波动在（１２５．６３±２８．０１）ｍｍＨｇ左右；收缩压约（１６５．０５４－３２．１０）ｍｍＨｇ；血压均值约（１３８．４４４－２８．２７）ｍｍＨｇ。由图４、图５和图６可以看到，从第８周到第１５周ＳＨＲ大鼠的心率、血流速度及血流量均有下降的 ＃方实验动材科技年舍实验动精科学目Ｋ＊《 ２∞９年１０月 ｌ８Ｗ ９Ｗ １０ＷＩＩＷｌ２Ｗ１３ＷｌａＷｌ５Ｗ 目１ ８—１５周峙钮Ｒ太鼠收缩Ｅ的变化 ８Ｗ ９Ｗ １０ｗ１１ｗ１２ｗ［３Ｗ１４Ｗ１５ｗ 田２ ８—１５周静ｓＨＲ太鼠舒张Ｅ的变化 ８１５月＊ｓＨＲ★＊＾Ⅲ目ｍ∞女ｍ 目３ ８－１５周龄ＳＨＲ大鼠ｍⅡ均值的变化 趋势，但是在各周存在一定的波动。心率波动在 （３６５ ７０±ｌ舛５６）日ｅ．／ｍｉｎ左右；血赢遘度在（３ ７１± ２３５）ｅｍ＾渡动；血流量约１８ １０±１３ １７ｍＬ／ｍｉｎ。 咖∞ 啪∞ 童５吡∞ 点枷∞ 面枷舯 ０２００ｍ １０ｎｍ ８ｗ ９ｗ １０ｗｌｌｗｌ２ｗ１３ｗ１４ｗ１５ｗ 田４ ８・ １５月＊ＳＨＲ太■０事的韭化 ２３组织切片的寰襄 在随机抽取的１５只动物中，心肌切片的病理变 化最为明显，其中有６只动物的心肌细胞发生变性 （田７．图８）。与正常的心肌细胞相比有明显的变 化。心肌细胞的变性率为加％。其他组织器官无 明显的病变（见囤２—３…１ ２３…２ ２３—３）。 一｛０一《Ⅷ《目 ≈｛一５ 一：．｛ｉ＊目 勰勰黜勰嬲勰 竺日｛Ｅ一目目 ２００９年ｌＯ月 ｜匕方＃§自＃科技｛会《＆自＃Ｈ｛目Ｋ☆ｋ ２４动格死亡情况 利用ＣＯＤＡ“无创血压仪．涮盘各血压参数的 过程中．在舅；一周和第三周各死亡一只ＳＨＲ大鼠。 并对其进行病理解剖检查，发现两只ＳＩｔＲ大鼠均有 肺水肿发生。其它脏器尤明硅内服可观的病理变 化。 ３结论和讨论 高血压是以体循环动脉血压增高为主要表现的 临床综台症，是最常见的心皿管筑病，近ＩＯ年发病 宰不断升高，引发仝身的小动脉硬化．从而影响组织 器官的血液供应，造成血管狭窄．常常引起心脑血管 及肾脏等痰病。在各种高血压并发症中，以心、脑、肾 的损害最为严重。同时．高血压伴有年龄的依麓性， 原发性高血压在老年人中的发病率最高。随着我国 人口的老龄化，研究不同年龄的高血压病人血压的 特征及治疗方法值得进一步关注。而研究不同同龄 自发性高血压大鼠血压的特征作为研究不同年龄高 血压病人的实验动物．更值得探人探讨。 在铡量大鼠血压方面由于麻醉可以影响血压和 药物反应，在体实验目前更趋向于去选择未麻醉、意 识清醒的动物，以便更好的去了解生物现象。对于 清醒动物血压指标的监测最普遍应用的技术是尾袖 加压法，但是加压将产生一些额外的审ｉ激．不同程度 使血浆儿荣酚胺和皮质醇漱素增加，从嗬人为的增 加了血压”。 本实验采用体积压力传感嚣技术测量清醒状态 下１５周ＳＨＲ大鼠的收缩压为（１７４ ４Ｉ±３３ ７４） ｍｍＨｇ。而在不同甩龄自发性高血压大鼠对降压药 反应性研究中”．采用尾袖加压法测量清醒状态下 １６周大鼠的收缩压为（１９１ ３３±２ ５１）ｍｍＨｇ；采用 Ｄ钳植入式生理信号遥测系统测量清醒大鼠收缩压 为（Ｉ ７２ ２０±０ ８１）ｍｍＨｇ。由Ｈ前得到数值看，采 用体积压力传感器技术测罐大鼠血压的效果与ＤＳＩ 檀人呔生理信号遥测系坑铡世的帆压值棚似。尽管 存在定额外刺澈．面涮量恤依然只有敛性和准 确性。 本研究采用ＣＯＤＡ“无创血压仪．即作｛｝｛压力 传感鼎技术测越８—１５用Ｓｉｌｌ｛太鼠的动态血压．随 着周龄的增加ＳＨＲ大鼠收缩压和心率值在各周之 可均无坑计学意土，而１５周鞍８周ＳＨＲ舒张压与 血压上；『值较高。并且之阃存在姓著差异。在血流速 度的比较中，第８周与第９、１ｌ、１２、１３、１４周之间存 在极显著差异；第８用与第１０、１５周之间存在品著 差异。在血流茸的比较中，第８周与第９、１Ｉ、１４周 之恻存在极显著差异。从第８岗到第１ ５周的血压 变化情况看，ＳＨＲ大鼠的舒张压、收缩压及血压均 值均有｝升的舀势；与Ｊｏｈｎ ＳＳｍｅｄａ研究相一 致”。心率、血流速度及ｍ流量均有下降的趋势． 但是在各周存在一定的波动，该现象未见系统报道。 在高血压病诊断、治疗以及相荚心血管瘐捕危险程 度的判断中．越来趣多的证据表明．动脉压增大是心 血管疾精的独立危险囚素”“。ｍ动脉压增大是由 于随年龄的增加“…．主动脉及其主要分支的弹性 下降。本实验观察不同连续周龄ＳＨＲ大鼠啦压床 平．随周龄的增加血压增高与上述结论一致。 在使用ＣＯＤＡＴＭ无刨血压仪时应该注意两个问 题：一是动物的合理保定．既根据动物体重选择合适 的保定盘，保定盒是可以台并变暗的圆锥体，限制动 物视野和减少动物压迫感。动物鼻子将透过保定盒 的前端，可以舒适呼吸。动物的尾巴可以充分地延 伸出来，并通过保定盘的后方舱口盖开关伸展出来。 合适太小的动物保定盘是为了更好的血压测量．如 果傈定盒太小影响动物的正常呼吸，动物为了补偿 呼吸将移动它的身体，因此造成人为的意外呼吸， 意外呼吸将导致尾巴过度活动和影响血压读数。二 是动物的保温．保证动物的体温非常重要，是保障血 压耐量准确性和一致性的必要手段。因为只有在尾 部有充分的血漉，才能保证血压信号的获取。晟好 办法是先在自备的瑗热装置上预热１５—２０ ｍｉｎ．然 后转移到测定装置的电热板上进行血压测量，由于 电热板可以维持动物适当的体温，使动物在很短的 时闻内完成测量。动物应该保持温暖和舒适，但不 能过热．如果过度加热会造成动物在测量过程中呼 吸频率加快，增加动物的压迫感。髟响动物的血压